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廣譜植物基因組 DNA 快速提取試劑盒

簡(jiǎn)要描述:

廣譜植物基因組 DNA 快速提取試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:人腺癌細(xì)胞系 Alexa Fluor 488標(biāo)記鏈霉親和 邊緣無(wú)漿體PCR檢測(cè)試劑盒 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒 N乙酰βD葡萄糖苷(NAG)活性比色法檢測(cè)試劑盒 草色串孢 鴨沙門(mén)氏菌抗體

更新時(shí)間:2024-01-12

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廣譜植物基因組 DNA 快速提取試劑盒

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

A-Hc2035

廣譜植物基因組 DNA 快速提取試劑盒

100

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保存條件:本試劑盒在室溫儲(chǔ)存12個(gè)月不影響使用效果。

產(chǎn)品介紹:

        該試劑盒采用DNA吸附柱和新型的溶液系統(tǒng),適合于從植物樣品中快速簡(jiǎn)單地提取基因組DNA。新鮮或干燥的植物組織(細(xì)胞)磨碎后經(jīng)裂解液裂解;蛋白質(zhì)、多糖、細(xì)胞殘片被沉淀去除;然后基因組DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟, 進(jìn)一步將多糖,多酚和細(xì)胞代謝物,蛋白等雜質(zhì)去除,最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈基因組DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。

產(chǎn)品特點(diǎn):

1.重復(fù)性好:離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。

 2.簡(jiǎn)單快速,單個(gè)樣品操作一般可在1小時(shí)內(nèi)完成。

3.多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7~1.9,可直接用于PCR,Southern-blot和各種酶切反應(yīng)。

自備試劑:無(wú)水乙醇

PCR 反應(yīng)需要使用哪些試劑和設(shè)備?

試劑:
模板DNA:PCR反應(yīng)需要模板DNA,如從細(xì)胞、組織、血液中提取DNA等;引物:PCR反應(yīng)的兩個(gè)引物,分別與模板DNA的兩端配對(duì)擴(kuò)增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為T(mén)A克隆等過(guò)程中使用到的引物;dNTPs:PCR反應(yīng)中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥(niǎo)苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細(xì)胞分裂、DNA合成等生物學(xué)過(guò)程,用于PCR擴(kuò)增的模板DNA鏈的延伸和擴(kuò)增;Taq DNA聚合酶:PCR反應(yīng)需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類(lèi)的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴(kuò)增DNA鏈;PCR buffer溶液:對(duì)PCR反應(yīng)具有緩沖作用,調(diào)節(jié)反應(yīng)pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機(jī)化合物如甲醛,可增強(qiáng)PCR反應(yīng)特異性,從而提高反應(yīng)效率;酶切體系:PCR擴(kuò)增往往涉及到重組、構(gòu)建和測(cè)序等等實(shí)驗(yàn)步驟,常常需要進(jìn)行酶切操作。MARK:一種分子量標(biāo)準(zhǔn),用來(lái)判別DNA片段大小的工具。DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應(yīng)產(chǎn)物;
設(shè)備:
PCR儀:用于控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)時(shí)不同溫度環(huán)節(jié)的嚴(yán)格控制;電泳槽:用于分離PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;核酸提取儀:從組織樣本中全自動(dòng)提取核酸。  這些試劑和設(shè)備在PCR分子生物學(xué)技術(shù)中均是,只有在有序齊全的基礎(chǔ)上,才能進(jìn)行PCR反應(yīng)并得出準(zhǔn)確結(jié)果。

PCR相關(guān)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn):

PCR反應(yīng)基本步驟一般的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)由20到35個(gè)循環(huán)組成,每個(gè)循環(huán)包括以下3個(gè)步驟:

一、變性:

利用高溫(93-98℃)使雙鏈DNA分離。高溫將連接兩條DNA鏈的氫鍵打斷。在第一個(gè)循環(huán)之前,通常加熱長(zhǎng)一些時(shí)間以確保模板和引物分離,僅以單鏈形式存在。該步驟時(shí)間1-2分鐘,接下來(lái)PCR儀就控制溫度進(jìn)入循環(huán)階段。

二、退火或稱(chēng)接合,復(fù)性:

在DNA雙鏈分離后,降低溫度使得引物可以結(jié)合于單鏈DNA上。此階段的溫度通常低于引物熔點(diǎn)5℃。錯(cuò)誤的退火溫度可能導(dǎo)致引物不與模板結(jié)合或者錯(cuò)誤地結(jié)合。該步驟時(shí)間1-2分鐘。

三、延伸:

DNA聚合酶由降溫時(shí)結(jié)合上的引物開(kāi)始沿著DNA鏈合成互補(bǔ)鏈。此階段的溫度依賴(lài)于DNA聚合酶。該步驟時(shí)間依賴(lài)于聚合酶以及需要合成的DNA片段長(zhǎng)度。傳統(tǒng)的Taq估計(jì)合成1000bp/min、較新的Tbr(來(lái)自于嗜熱菌Thermus brockianus)約40秒、商業(yè)公司生產(chǎn)的融合型聚合酶僅需約10-15秒。

PCR反應(yīng)條件優(yōu)化:

1、變性溫度和時(shí)間:

保證模板DNA解鏈?zhǔn)潜WC整個(gè)PCR擴(kuò)增成功的關(guān)鍵。加熱90~95°C, 30~60s,再?gòu)?fù)雜的DNA 分子也可變性為單鏈。溫度過(guò)高或高溫持續(xù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),可對(duì)Taq酶活性和dNTP分子造成損害。

2、復(fù)性溫度和時(shí)間:

PCR擴(kuò)增特異性取決于復(fù)性過(guò)程中引物與模板的結(jié)合。復(fù)性溫度越高,產(chǎn)物特異性越高。復(fù)性溫度越低,產(chǎn)物特異性越低。需根據(jù)引物的Tm值具體設(shè)定。

3、延伸溫度和時(shí)間:

一般位于Taq酶最適作用溫度70~75°C之間。引物小于16個(gè)核苷酸時(shí),過(guò)高的延伸溫度不利于引物與模板的結(jié)合,可以緩慢升溫到70~75°C。延伸反應(yīng)時(shí)間,可根據(jù)待擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度而定,小于1kb, 1min足夠;大于1kb需加長(zhǎng)延伸時(shí)間。Taq酶可根據(jù)1kb/min增加時(shí)間。這里需要注意,延伸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能出現(xiàn)非特異擴(kuò)增。因此需要設(shè)置恰到好處的延伸時(shí)間。

4、循環(huán)數(shù):

其他參數(shù)選定后,PCR循環(huán)次數(shù)主要取決于模板DNA的濃度。理論上說(shuō)20?25次循環(huán)后,PCR產(chǎn)物的積累即可達(dá)到最大值,實(shí)際操作中由于每步反應(yīng)的產(chǎn)率不可能達(dá)到100%,因此不管模板濃度是多少,20~30次是比較合理的循環(huán)次數(shù)。循環(huán)次數(shù)越多,非特異擴(kuò)增增加。

公司正在出售的產(chǎn)品:

牛血吸蟲(chóng)染料法熒光定量PCR試劑盒

丁型肝炎病毒抗體ELISA試劑盒 HDV antibody免費(fèi)代測(cè)試劑

甲型肝炎病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

垂盆草染料法PCR鑒定試劑盒

補(bǔ)體1抑制物抗體-IgMELISA試劑盒 C1INH-IgM免費(fèi)代測(cè)試劑

前病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

細(xì)小病毒B PCR檢測(cè)試劑盒

復(fù)合2ELISA試劑盒

木瓜特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒

同白斑綜合癥病毒PCR檢測(cè)試劑盒

補(bǔ)體片段3cELISA試劑盒

牡蠣包拉米蟲(chóng)染料法熒光定量PCR試劑盒

淋病奈瑟菌染料法熒光定量PCR試劑盒

程序性細(xì)胞死亡因子4ELISA試劑盒

犬皰疹病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

犬利什曼原蟲(chóng)染料法熒光定量PCR試劑盒

大腸癌專(zhuān)一抗原3ELISA試劑盒

玉米T25 PCR檢測(cè)試劑盒

犬諾瓦克病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

彈性蛋白2BELISA試劑盒

牛羚關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

鄰單胞菌通用PCR檢測(cè)試劑盒

蛋白激抑制因子αELISA試劑盒

馬傳染性貧血病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

鏈球菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒

低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白體9ELISA試劑盒

綿羊星狀病毒通用探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒

輕型鏈球菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

短蛋白聚糖ELISA試劑盒

牡蠣皰疹病毒(OsHV)核檢測(cè)試劑盒

柯薩奇病毒B2PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

人果糖胺(FRA)檢測(cè)試劑盒elisa

牛羚關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

禽白血病病毒通用探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒

人水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒ELISA

枳實(shí)染料法PCR鑒定試劑盒

登革病毒1型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

廣譜植物基因組 DNA 快速提取試劑盒人脯氨/氨酰胺富含性剪接因子(SFPQ)ELISA試劑盒

純綠青霉探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

勞森菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

P0蛋白抗體(IgM)試劑盒ELISA

豬胸膜肺炎放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

鴨特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒

人白色念珠菌(C.albicans)ELISA檢測(cè)試劑盒

牛流行熱病毒PCR檢測(cè)試劑盒

 


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